Cos'è la cromatofocalizzazione?

Cos'è la cromatofocalizzazione?
Anonim

Risposta:

La cromatofocalizzazione è una tecnica di separazione proteica che consente la risoluzione di singole proteine e altri anfoliti da una miscela complessa in base alle differenze nei loro punti isoelettrici.

Spiegazione:

Questa tecnica è stata introdotta da Stuyterman e dai suoi colleghi tra il 1977 e il 1981. Il cromatofocusing utilizza resine a scambio ionico ed è tipicamente eseguito su una cromatografia liquida a proteine veloci.

Usa un impacco di colonne di scambio ionico e un gradiente di pH generato internamente che attraversa la colonna come un fronte trattenuto. L'interazione tra il gradiente di pH e le sostanze anfotere come le proteine fa sì che queste sostanze escano dalla colonna cromatografica in punti caratteristici dell'effluente come bande focalizzate.

Questa tecnica cromatografica a gradiente di eluizione è un potente strumento di purificazione per quanto riguarda le proteine, in quanto può risolvere specie molto simili che differiscono appena di 0,02 limiti di pH, che potrebbero non separarsi bene utilizzando le tradizionali strategie di scambio ionico.