Cos'è il western blotting?

Cos'è il western blotting?
Anonim

Risposta:

È l'uso di anticorpi per rilevare le proteine che sono state separate da SDS-PAGE e quindi trasferite su una membrana.

Spiegazione:

Le cellule contengono una miscela di proteine (molte migliaia) e queste possono essere separate da SDS-PAGE.

Le proteine dalla SDS-PAGE vengono poi trasferite, mediante l'uso di un campo elettrico, dal gel a una membrana fatta tipicamente nitrocellulosa o polivinilidene fluoruro (PVDF).

La membrana viene sondata con un anticorpo primario specifico per la proteina di interesse. Un anticorpo secondario viene quindi utilizzato per rilevare l'anticorpo primario. L'anticorpo secondario conterrà un marker che può essere rilevato da una reazione chimica per dare una banda visibile sulla membrana, o un segnale che può essere catturato da una telecamera specializzata.

Se necessario, posso approfondire questa risposta in modo approfondito, dato che durante la mia carriera ho eseguito diverse centinaia di macchine occidentali.