Risposta:
Per purificare la frazione proteica …
Spiegazione:
Se stai purificando una proteina (spesso specifica), dovrai liberarti della maggior quantità di rifiuti possibile che potrebbe essere legata a loro.
Dipende in larga misura da quale proteina si sta cercando, ma generalmente è una buona idea, specialmente in preparatorio purificazione, per sbarazzarsi di quante più impurità possibili.
1:
Poiché le proteine sono generalmente di grandi dimensioni e, di conseguenza, appariranno nelle bande inferiori della frazione (ultracentrifugata), si vuole sbarazzarsi di qualsiasi acido nucleico, specialmente se la proteina che si sta purificando riguarda quelli del tipo Pol1, Trascrittasi inversa o qualsiasi altro enzima coinvolto in Replication / Transcription / Translation..
Puoi separare gli acidi nucleici presenti nel campione usando un DNAse: questo idrolizzerà totalmente il DNA nelle sue parti costituenti.
Intendiamoci, ci sono vari DNAse, tutti diversi nel loro meccanismo e specificità per il loro substrato. A seconda del DNA utilizzato, può mostrare entrambi Endo- o exo- attività nucleasica …
Più precisamente, RNAsi è più adatto, poiché l'RNA è solitamente più all'interno della gamma di galleggiabilità / frazione di proteine e può essere legato alla proteina.
2:
lisozima: Un enzima che ha almeno due funzioni:
Gli enzimi deglicosilati: la maggior parte delle proteine trasportate nel sangue sono glicosilate: hanno alcune molecole di zucchero attaccate a loro. Il lisozima rimuoverà i residui di zucchero.
Ha anche la capacità di abbattere la parete cellulare dei batteri Gram-positivi, causandoli a Lyse. (se si vuole purificare la proteina dai batteri Gram-positivi)
A causa della loro galleggiabilità "più leggera", qualsiasi prodotto degradato, acido nucleico o residui di zucchero, apparirà nelle frazioni superiori della centrifuga.
Quali sono alcuni esempi di metodi di purificazione delle proteine?
Filtrazione della membrana per dialisi a precipitazione Se si conosce il punto isoelettrico della proteina, è possibile precipitare e filtrare o centrifugare la frazione proteica mediante la regolazione del pH. Le proteine sono molecole piuttosto grandi e la dialisi o la filtrazione a membrana può essere utilizzata per rimuovere le impurità che passeranno facilmente attraverso i pori di una membrana pur mantenendo la frazione proteica.
Perché le lastre di NaCl vengono utilizzate al posto delle lastre di quarzo nella spettroscopia IR per caricare il campione?
Perché il vetro (cioè il quarzo) assorbe lo spettro IR e maschera l'assorbimento del campione. Gli assorbimenti di NaCl sono trasparenti alla maggior parte dello spettro IR; ci sono assorbimenti a 400-600cm ^ (- 1), che lascia la maggior parte dello spettro trasparente.
Perché la presenza di proteine nelle urine potrebbe indicare danni ai reni? Inoltre, perché la presenza di glucosio nelle urine dovrebbe causare preoccupazione?
Tracce di albumina sono sempre presenti nelle urine. L'urina è il filtro del sangue mangiato. Piccole quantità di albumina sono sempre presenti nelle urine. Ma se questo aumenta mostra danno glomerulare. Il glucosio se è superiore a 150 mg per decilitro mostra la sua presenza nell'esame delle urine, il glucosio inferiore a 140 mg per decilitro viene assorbito attraverso i reni. Il glucosio rilevabile nelle urine indica il diabete.