Perché è essenziale utilizzare lo stesso enzima di restrizione per tagliare (tagliare) il DNA di entrambi gli organismi utilizzati per creare un organismo transgenico?

Perché è essenziale utilizzare lo stesso enzima di restrizione per tagliare (tagliare) il DNA di entrambi gli organismi utilizzati per creare un organismo transgenico?
Anonim

Risposta:

Vedi sotto…

Spiegazione:

Gli enzimi di restrizione vengono tagliati in sequenze specifiche, pertanto è necessario utilizzare lo stesso enzima di restrizione perché produrrà frammenti con le stesse estremità adesive complementari, rendendo possibile la formazione di legami tra di loro.

Esistono alcuni siti di restrizione compatibili che possono essere utilizzati insieme. Xho1 e Sal1 sono esempi. Le loro estremità appiccicose corrispondono e quindi possono essere ligate insieme. Ma la legatura uccide sia il sito Xho1 che Sal1, quindi non puoi usare nessuno di questi per tagliare di nuovo (nelle posizioni di legatura).

Puoi anche usare l'esonucleasi o la PCR per ottenere le estremità più appiccicose (5 o 3 strapiombi) in siti contundenti - in questo modo è possibile ligare in un sito smussato - ma questo in genere uccide anche il sito smussato.