In che modo gli scienziati isolano il DNA per studiarlo?

In che modo gli scienziati isolano il DNA per studiarlo?
Anonim

Risposta:

Ci sono un paio di passaggi per farlo, per favore ignora il mio pessimo inglese, spero che tu possa ancora capire il processo.

Spiegazione:

Non è così difficile come potresti pensare.

Diciamo che vogliamo isolare il DNA da un timo di vitello, devi seguire queste istruzioni (sono uguali per una mela per quanto ne so, ma ci sono piccole variazioni):

  1. Prendi 3 pezzi di 3 grammi e tagliali in piccoli pezzi, il più piccolo possibile.

  2. Mettilo in un frullatore, con 75 ml di salino-citrato di sodio (SSC) per pezzo e assicurati che la lama del frullatore sia completamente coperta in SSC, quindi aggiungi un pezzo di timo se necessario.

    SSC si assicura che le membrane cellulari si stiano sciogliendo.

    Continua a miscelare finché tutto è liscio.

  3. Metterlo in un tubo per la centrifuga e tararlo con un altro tubo in modo che la centrifuga non si rompa

  4. Posizionare la provetta nella centrifuga per 20 minuti a 5000 rpm

  5. Quando si estraggono i tubi dalla centrifuga, si vedranno due componenti. Il fondo ha una sostanza solida, questo è chiamato il pellet e questo tiene i nuclei delle cellule con il DNA. Vedrai anche una sostanza liquida, che è chiamata supernatante e che consiste nell'SSC con le membrane cellulari dissolte.

  6. Versare il surnatante in un movimento fluido, questo si chiama decantazione e questo ti lascia con il pellet.

  7. Mettere una piccola quantità di NaCl 2,2 M nel tubo con il pellet, in modo che il pellet sia appena coperto in NaCl. Il NaCl fa precipitare le proteine che circondano il DNA.

  8. Mescolare con una provetta vuota o un'asta di agitazione. Alla fine dovresti ottenere due componenti. Le proteine sul fondo e un fluido viscoso in cima a quello.

  9. Estrarre il fluido viscoso con una pipetta e assicurarsi di non assumere alcuna proteina con il fluido viscoso. (pezzi di proteine molto piccoli sono molto difficili da evitare, ma cerca di evitare quante più proteine possibile)

  10. Metti il fluido viscoso che hai fornito in un becher e aggiungi 2 volte più etanolo. Ma aggiungi l'etanolo delicatamente perché non vuoi mescolarlo con il DNA. All'interfaccia tra l'etanolo e il fluido viscoso dovresti vedere le bolle del DNA che si formano.

  11. Mescolare delicatamente con una bacchetta di vetro, il DNA è caricato negativamente in modo che si attacchi alla barra.

  12. Metterlo in una provetta e scioglierlo con SSC.

Una macchina speciale può quindi dirti quanto DNA hai isolato e quanto è puro.